建立了高效液相色譜法對(duì)涂料中乙酸苯基汞進(jìn)行檢測的方法。樣品經(jīng)稀釋后，以V(乙腈)∶V(2mmoLNH4Ac)=90∶10為流動(dòng)相，C18柱高效液相色譜分離，DAD為檢測器，檢測波長為195nm。結(jié)果表明，線性范圍為0·1~10mg/L(相關(guān)系數(shù)r2=0·9995)，檢出限為0·097mg/L(相當(dāng)于涂料中質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2·43×10-3%)，對(duì)涂料樣品進(jìn)行5個(gè)不同濃度水平的添加回收，回收率為97·3%~103·1%，RSD≤4·5%(n=7)。本法具有較高的選擇性、靈敏度和準(zhǔn)確度，能滿足涂料中乙酸苯基汞的測定分析。

　　相對(duì)分子質(zhì)量是336·73，是一種高效的殺菌劑，可用作種子消毒、并能用作粉劑或噴灑劑，也有用作選擇性除莠劑，工業(yè)上用作紡織品、紙張、皮革、涂料等的防霉劑。涂料中添加乙酸苯基汞的質(zhì)量分?jǐn)?shù)一般為0·025%~0·5%[1]。

　　乙酸苯基汞對(duì)皮膚、眼睛和呼吸道有中毒刺激作用，能使皮膚產(chǎn)生過敏反應(yīng)。由于汞在人體內(nèi)有累積性，許多國家都規(guī)定食物內(nèi)不容許有汞量殘留。美國在蔬菜上一概拒絕使用。我國將乙酸苯基汞列為第一批禁止或嚴(yán)格限制的有毒化學(xué)品。強(qiáng)制性國家標(biāo)準(zhǔn)GB18582-2001[2]對(duì)內(nèi)墻涂料中汞的限量為可溶性汞≤60mg/kg，并且是指涂膜干燥后用0.07mol/LHCl將pH調(diào)為1.0~1.5之間，測定該溶液中的可溶性汞，不能測定PMA。本文建立了HPLC/DAD方法測定涂料中的PMA。

　　1、實(shí)驗(yàn)部分

　　1.1儀器與裝置

　　HP1100液相色譜儀(Agilent公司);Venusil-XBPC18柱(4.6mmi.d.×250mm，5μm)(Agela科技公司);全玻璃溶劑過濾器(DIKMA);LXJ-ⅡB型多管離心機(jī)(shanghaiantingkexueyiqichang);2mL1次性注射器(美國BD公司);0.45μm/Ф13mmPTFE針式過濾頭(Agilent公司)。

　　1.2材料與試劑

　　乙腈(HPLC級(jí)，F(xiàn)isherScientific，美國)，超純水(Mili-QPlus超純水系統(tǒng)制備)，PMA標(biāo)準(zhǔn)樣品(Labor.Dr.Ehrenstorfer.Bgm.-Schlosser-STR.6A.86199Augsburg，純度99.0%，德國)，2mmoLNH4Ac溶液(去離子水當(dāng)天配置)。

　　1.3標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制

　　1.3.1標(biāo)準(zhǔn)貯備溶液的制備用乙腈配制1000mg/L標(biāo)準(zhǔn)貯備液，棕色硅烷化反應(yīng)瓶盛裝，-20℃黑暗保存。

　　1.3.2標(biāo)準(zhǔn)工作溶液的制備

　　將1000mg/L標(biāo)準(zhǔn)貯備液用乙腈稀釋成500，200，100，50，20，10，5，2，1，0.5，0.2，0.1mg/L，-20℃黑暗保存。

　　1.4液相色譜條件

　　色譜柱:VenusilXBP-C18(4.6mmi.d.×250mm，5μm);柱溫:室溫;流動(dòng)相:V(乙腈)∶V(2mmoLNH4Ac)=90∶10;流速0.5mL/min;進(jìn)樣體積10μL;紫外檢測波長195nm。

　　1.5測定方法

　　稱取約0.10g涂料樣品用乙腈溶解并定容至100mL，超聲混勻，取4mL該溶液，在離心機(jī)上經(jīng)1800r/min離心15min，靜置15min，取上層清液，經(jīng)0.45μmPTFE過濾頭過濾，在HPLC/DAD上按1.4的色譜條件分析測定。

　　2、結(jié)果與討論

　　2.1檢測波長的確定以5mg/L的PMA標(biāo)準(zhǔn)品溶液進(jìn)樣，以DAD為檢測器測定。

　　從乙酸苯基汞的紫外光譜圖可以看出，在195nm時(shí)乙酸苯基汞的紫外吸收值最大。所以選擇檢測波長為195nm。

　　2.2流速的選擇

　　選擇5mg/L的乙酸苯基汞標(biāo)準(zhǔn)溶液，采用不同流速進(jìn)樣，色譜峰的保留時(shí)間和響應(yīng)值不同。

　　比較實(shí)驗(yàn)結(jié)果，綜合考慮保留時(shí)間和響應(yīng)值對(duì)色譜峰的影響，本實(shí)驗(yàn)流速選用0.5mL/min。

　　2.3標(biāo)準(zhǔn)品溶液的穩(wěn)定性

　　選擇5mg/L的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液放入冰箱-20℃黑暗保存，每天取0.3mL，進(jìn)樣分析，平行測定3次響應(yīng)值，轉(zhuǎn)換成標(biāo)準(zhǔn)品濃度，計(jì)算平均值，以第1天的測定結(jié)果為標(biāo)準(zhǔn)，以后各天與第1天的測定結(jié)果進(jìn)行比較。

　　采用t檢驗(yàn)法對(duì)乙酸苯基汞標(biāo)準(zhǔn)品放置2個(gè)月的濃度進(jìn)行檢驗(yàn)(置信水平95%)，t=0·9712.4標(biāo)準(zhǔn)曲線配制標(biāo)準(zhǔn)系列，采用1.5分析條件，以待測物的質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，待測物的響應(yīng)值為縱坐標(biāo)作圖，標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為y=101·97ρ-0·70，線性范圍為0·1~10mg/L，線性相關(guān)系數(shù)R2=0·9995，可以看出該法具有較高的靈敏度。

　　2.5加標(biāo)回收率

　　稱取數(shù)份約0·100g涂料，按1·4先做空白實(shí)驗(yàn)。分別添加質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別為0·025%，0·1%，0·125%，0·25%，0·5%的乙酸苯基汞標(biāo)準(zhǔn)品溶液，每種濃度作7個(gè)平行樣，計(jì)算平均回收率、標(biāo)準(zhǔn)偏差和相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差。用回收率表征方法的準(zhǔn)確性，用相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)表征方法的重復(fù)性。

　　2.6方法檢出限(LOD)

　　根據(jù)NATA(NationalAssociationofTestingAu-thoritiesAustralia)給出的化學(xué)測試方法驗(yàn)證指導(dǎo)(GuidelinesforthevalidationandVerificationofChem-icalTestMethods，2004)，進(jìn)行3個(gè)濃度水平的添加回收實(shí)驗(yàn)，每個(gè)濃度水平7個(gè)平行實(shí)驗(yàn)。以7個(gè)平行實(shí)驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)偏差對(duì)濃度作圖，曲線在Y軸上的截距為S0，LOD=3×S0(置信水平95%)。參照2.5步驟，以質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.125%，0.25%，0.5%添加回收得出本方法的檢出限(LOD)(置信水平95%)為0.097mg/L，相當(dāng)于涂料樣品中添加質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2.43×10-3%，。

　　2.7樣品測定

　　參照1.5方法處理涂料樣品，根據(jù)色譜峰保留時(shí)間和DAD紫外光譜圖進(jìn)行定性，計(jì)算樣品中乙酸苯基汞的質(zhì)量分?jǐn)?shù)